Revista de investigación sobre farmacia y administración de medicamentos

Desarrollo y validación de un método cromatográfico para la cuantificación de isoniazida en plasma humano

Alshaikheid M, Fredj NB, Chaabane A, Chadli Z, Slama A, Boughattas N, Lassoued MA, Aouam K

Objetivo: La isoniazida (INH) es un importante tratamiento antituberculoso, caracterizado por un estrecho margen terapéutico y una gran variabilidad intra e interpaciente. Por lo tanto, la monitorización terapéutica de este fármaco es obligatoria para optimizar la eficacia y minimizar la aparición de efectos secundarios tóxicos. El objetivo del presente estudio es desarrollar y validar un método cromatográfico simple para la determinación de INH en plasma humano.

Métodos: Se realizó cromatografía líquida de alta resolución utilizando un cromatógrafo Ultimate 3000®. La extracción de INH del plasma se realizó utilizando ácido tricloroacético (TCA). Se utilizó nicotinamida como estándar interno (IS). La fase móvil consistió en la solución tampón acetato de amonio (99%) 0,05 M ajustado con ácido acético glacial a pH 6 (99%), y acetonitrilo (1%). La separación cromatográfica se logró en una columna C18 (5 μm, 4,6 x 150 mm) a 20 °C. Las señales se monitorearon mediante un detector de matriz de diodos (DAD) a una longitud de onda (λ) de 265 nm, a una velocidad de flujo de 1,2 ml/min.

Resultados: Los tiempos de retención de INH e IS fueron 6,4 y 10,5 respectivamente. Los límites de detección y cuantificación de INH fueron 0,09 y 0,3 μg/ml, respectivamente. El presente método es específico y lineal en el rango de 0,5 a 8 μg/ml con un coeficiente de regresión de 0,998. Además, este método es preciso y exacto, como lo demuestran las pruebas estadísticas adecuadas recomendadas para la validación de métodos bioanalíticos.

Conclusión: Desarrollamos y validamos un método simple, rápido y conveniente para la determinación de INH plasmático en pacientes con tuberculosis que reciben este tratamiento.