Revista de investigación sobre farmacia y administración de medicamentos

Fludarabina (C2-metilhidroxifosforamida) [anti-IGF-1R]: síntesis y citotoxicidad antineoplásica selectivamente dirigida contra el adenocarcinoma pulmonar (A549)

Coyne CP y Lakshmi Narayanan

Fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R]: síntesis y citotoxicidad antineoplásica selectivamente “dirigida” contra el adenocarcinoma pulmonar (A549)

Introducción: Muchos de los agentes quimioterapéuticos convencionales de bajo peso molecular, si no la mayoría, son muy potentes contra muchas formas de enfermedad neoplásica. Desafortunadamente, la mayor parte de la dosis administrada se difunde de manera pasiva e involuntaria hacia los tejidos normales y los sistemas orgánicos sanos luego de la administración intravenosa. Una estrategia para aumentar la potencia y reducir las secuelas limitadas por la dosis es la administración selectiva y “dirigida” de agentes quimioterapéuticos convencionales.

Materiales y métodos: La fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] se sintetizó haciendo reaccionar inicialmente la fludarabina con una carbodiimida para formar un intermediario de éster de fosfato de carbodiimida de fludarabina que posteriormente se hizo reaccionar con imidazol para crear un intermediario de fludarabina-(C2-fosforilimidazolida) reactivo a amina. La inmunoglobulina anti-IGF-1R monoclonal se combinó con el intermediario de fludarabina-(C2-fosforilimidazolida) reactivo a amina, lo que dio como resultado la síntesis del inmunoquimioterapéutico covalente fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] . La fludarabina residual y los reactivos que no reaccionaron se eliminaron mediante microfiltración en serie (MWCO 10 000) y se monitorearon mediante HP-TLC a escala analítica. La avidez de unión de IGF-1R retenida de fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] se estableció mediante ELISA celular utilizando células de adenocarcinoma pulmonar (A549) que sobreexpresan IGF-1R y EGFR. La potencia citotóxica antineoplásica de fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] se determinó frente a adenocarcinoma pulmonar (A549) utilizando una metodología de tinción de vitalidad basada en MTT.

Resultados: El índice de incorporación molar de fludarabina para fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-R1] fue de 3,67:1, mientras que la fludarabina unida de forma no covalente no se detectó mediante HP-TLC a escala analítica después de la microfiltración en serie. La separación por tamaño de fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] mediante SDS-PAGE con autorradiografía quimioluminiscente detectó solo una única banda de 150 kDa. La ELISA celular de fludarabina-(C2-metilhidroxifosforamida)-[anti-IGF-1R] que mide la inmunoglobulina total unida a las membranas de la superficie exterior del adenocarcinoma pulmonar (A549) aumentó con las elevaciones