Revista internacional de investigación cardiovascular

Fiabilidad test-retest de la cuantificación citométrica de flujo de células endoteliales circulantes y células progenitoras endoteliales en enfermedades cardiovasculares

Josephine Buescher, Fabian Weisrock, Max Fritschka, Sebastian Beckmann, Simon Litmeier, Elvis Tahirovic, Sara Radenovic, Andreas Busjahn, Thomas Krahn, Wilfried Dinh y Hans-Dirk Düengen

Las células endoteliales circulantes (CEC) y las células progenitoras endoteliales (EPC) están ganando importancia como biomarcadores cuantificables sustitutos de la disfunción endotelial (DE). La falta de una definición común y, en consecuencia, un método de cuantificación estandarizado ha limitado la aplicabilidad clínica de estos biomarcadores. Se requiere un método confiable, reproducible y práctico para lograr el potencial completo de estos parámetros. El objetivo de este estudio fue evaluar la confiabilidad de la prueba-reprueba durante un corto período de tiempo (~7 días) de la cuantificación citométrica de flujo de CEC y EPC en sangre completa humana de pacientes con enfermedad cardiovascular. Se incluyeron 100 pacientes (edad media 65 años ± 10 años, 30 mujeres) en un estudio prospectivo que constaba de 4 grupos de pacientes: insuficiencia cardíaca con fracción de eyección reducida (ICFEr; n = 25), insuficiencia cardíaca con fracción de eyección preservada (ICFEp; n = 26), nefropatía diabética (ND; n = 25) e hipertensión (HTN; n = 24). Además, se incluyeron 11 voluntarios sanos como grupo de control. En 2 visitas de estudio, se extrajo una muestra de sangre, que se sometió a una secuencia idéntica de preparación y análisis. Se evaluaron los CEC (ADN+, CD45 dim, CD31+ y CD146+) y las EPC (CD45 dim, CD34 br, CD133+ y CD31+, la fiabilidad de la prueba-reprueba a corto plazo de FSC, la correlación (correlación intraclase) y la concordancia (gráfico de Bland-Altman) de las mediciones obtenidas en las 2 visitas del estudio. En todos los pacientes, la mediana de CEC/ml y EPC/ml fue de 12 (percentil 5/95: 6/22) y 679 (447/1281) en la visita 1 y fue de 11 (6/24) y 736 (510/1105) en la visita 2, respectivamente; la correlación intraclase (ICC) fue deficiente para el recuento de CEC (0,106; ICC-IC del 95 %-0,08-0,29) y buena para el recuento de EPC (0,9; 0,86- 0,93). En pacientes con ICFEp, el CCI fue deficiente para el recuento de CEC (0,294; IC del 95 %: 0,08-0,6) y moderado en fuerza para el recuento de EPC (0,694; 0,43-0,85). En pacientes con ICFEr, el CCI fue deficiente para el recuento de CEC (0,076; -0,32-0,45) y excelente en fuerza para el recuento de EPC (0,946; 0,88-0,98). En pacientes con DN, el CCI fue deficiente para el recuento de CEC (-0,031; -0,44-0,37) y excelente en fuerza para el recuento de EPC (0,946; 0,88-0,98). En pacientes con HTA, el CCI fue deficiente para el recuento de CEC (0,143; -0,27-0,51) y moderada en fuerza para el recuento de EPC (0,668; 0,37-0,84). En los controles sanos, el ICC fue deficiente para el recuento de CEC (0,378-0,26-0,78) y bueno en fuerza para el recuento de EPC (0,846; 0,59-0,96). Un gráfico de Bland-Altman mostró una correlación positiva de las variaciones de las diferencias y el aumento de los recuentos medianos de CEC; no hubo tendencias claras para los recuentos medianos de EPC. Nuestros análisis indican que la cuantificación citométrica de flujo de las concentraciones de EPC es confiable en pacientes con ICFEp, ICFEr, DN e HTA. La cuantificación de las concentraciones de CEC mostró una confiabilidad test-retest deficiente en todos los grupos de pacientes. Se necesita más investigación para dilucidar la naturaleza de este hallazgo, que podría deberse a una mayor variabilidad biológica en pacientes con DE grave. Identificador de registro de ensayo clínico: NCT02299960