Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Un genosensor amperométrico para la detección del virus causante de la enfermedad de Marek en aves de corral

Poonam Nandal, Rahul Khatri, Vishakha Aggarwal, Ravina, Minakshi Prasad, Hari Mohan y Chandra S. Pundir

La sonda de ADN 5'-tiolada del gen oncogénico Meq, que consta de 24 desoxinucleótidos, se redujo con ditiotreitol (DTT) y se inmovilizó covalentemente a través de un enlace tiolado sobre un electrodo de oro, seguido de una hibridación con 1-4 ng/μl de sonda de ADN monocatenario (ss) del virus de la enfermedad de Marek (MDV) de una muestra de tumor de pollo durante 10 min a temperatura ambiente. El Meqgenosensor pudo detectar 1 ngss-ADN en muestras de tumor en min mediante voltamperometría cíclica (CV), voltamperometría de pulso diferencial (DPV) e impedancia electroquímica (EI). El electrodo de Au modificado con ssADN se caracterizó mediante espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FTIR) y microscopía electrónica de barrido (SEM). Se construyó un genosensor amperométrico para la detección del gen Meq conectando un electrodo de Au modificado con ssDNA (electrodo de trabajo) con un electrodo de Ag/AgCl (electrodo de referencia) y un cable de Pt (como electrodo auxiliar) a través de un potenciostato. La hibridación entre la sonda de ssDNA y el ssDNA objetivo se detectó mediante la reducción de la corriente generada por la interacción del azul de metileno (MB) con G' libre del oligonucleótido monocatenario. El electrodo de Au de ssDNA mostró una corriente óptima en 10 min a pH 8, 250C. Este es el primer informe sobre la construcción de un genosensor para la detección simple, rápida y específica de MDV en pollos.