Revista de métodos y biología molecular

Comparación de la determinación del sexo fetal en ratas mediante el uso de ADN genómico y ARNm placentario mediante qRT-PCR

Anthony L. Su y Rita Loch-Caruso

Existe una creciente necesidad de considerar el sexo fetal como una variable biológica y evaluar con precisión los efectos específicos del sexo. Entre los múltiples métodos utilizados para determinar el sexo fetal, la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) de Sry (región Y determinante del sexo) con ADN genómico (gDNA) se utiliza comúnmente, además del uso de metodologías como la transcriptómica y la detección de corpúsculos de Barr. Sin embargo, el ARN mensajero (ARNm) de Sry, un producto del SrygDNA, no se ha evaluado anteriormente para la determinación del sexo. Utilizando muestras de placenta de ratas Wistar preñadas cronometradas en el día de gestación (GD) 16, este estudio evaluó la compatibilidad de la detección de Sry utilizando gDNA versus mRNA para determinar el sexo fetal. Las muestras utilizadas en este estudio actual provienen de un estudio más amplio que investigó la toxicidad reproductiva del tricloroetileno (TCE) y la modulación potencial por N-acetil-L-cisteína (NAC) y ácido aminooxiacético (AOAA). En 90 de las 91 muestras, la clasificación sexual determinada por el ADN genómico coincidió con la clasificación sexual determinada por los valores de Sry (Sry/B2m) analizados por el ARNm. Tanto para el ADN genómico como para el ARNm, se observaron diferencias estadísticamente significativas en los valores de Sry/B2m entre machos y hembras con las muestras consideradas en su totalidad y cuando las muestras se separaron por grupos de tratamiento (todas las comparaciones fueron p<0,01 o inferiores, y todas las comparaciones excepto dos fueron p<0,001 o inferiores). Finalmente, también se discutió la validez de utilizar los valores de SryCq para determinar el sexo fetal y el gen de referencia B2m. En conjunto, este estudio sugiere que la determinación del sexo fetal en ratas Wistar se puede lograr utilizando mediciones de Sry en el ADN genómico o el ARNm con resultados altamente compatibles.