Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Comparación de tres métodos alternativos para la detección de resistencia al benzimidazol en nematodos gastrointestinales en cabras

AK Dixit, G Das y Pooja Dixit

La presente investigación se planificó con el objetivo de estudiar el estado de la resistencia al benzimidazol en nematodos gastrointestinales de cabras en la granja Amanala, Jabalpur utilizando la prueba de reducción del recuento de huevos fecales in vivo (FECRT), el ensayo de eclosión de huevos in vitro (EHA) y la prueba molecular - PCR específica de alelo (AS-PCR). La FECRT y el ensayo de eclosión de huevos se llevaron a cabo según lo descrito por Coles et al. (2006). La AS-PCR se realizó según Chandra et al. (2015) con modificaciones menores. En la prueba FECR, el fenbendazol redujo el recuento de huevos fecales en un 23% con un intervalo de confianza inferior de ¬-32%. Haemonchus contortus, Trichostrongylus spp., Oesophagostomum spp., Strongyloides spp. y Bunostomum spp. Se identificaron larvas en los cultivos fecales previos al tratamiento, pero el coprocultivo posterior al tratamiento reveló que H. contortus (92%) era el principal nematodo que exhibía resistencia, seguido de Oesophagostomum spp. (8%). El valor de la dosis efectiva (ED50) de 0,335 μg/ml de tiabendazol confirmó la existencia de nematodos resistentes al benzimidazol en el ensayo de eclosión de huevos. En la prueba molecular, el tamaño del amplicón de PCR anidado fue de aproximadamente 820 pb y los fragmentos digeridos con RFLP de RsaI mostraron fragmentos principales de 550 pb, 170 pb y 100 pb. El tamaño del gen específico del alelo susceptible, el gen específico del alelo resistente y el gen no específico del alelo fueron 603 pb, 222 pb y 774 pb, respectivamente. Los resultados de la PCR-AS mostraron que el 62% de las larvas de H. contortus eran homocigotas resistentes (rr), el 24% heterocigotas (rS) y el 14% homocigotas susceptibles (SS). La prevalencia del alelo de resistencia al benzimidazol (r) también fue significativamente (p<0,01) mayor (74%) en comparación con el alelo susceptible (S) (26%). Aunque el resultado de todas las pruebas indicó la presencia de nematodos resistentes al benzimidazol, la FECRT reveló el género de los nematodos resistentes, mientras que la PCR-AS también detectó genotipos (rr, rS, SS) de la población de H. contortus.