Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Diseño de una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de causas específicas de tuberculosis (TB) en el ganado lechero y en humanos

Hossain MZ, Rima UK, Islam MS, Habib MA, Chowdhury MGA, Saha PC, Chowdhury EH y Khan Mahna

Diseño de una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de causas específicas de tuberculosis (TB) en el ganado lechero y en humanos

La tuberculosis (TB) en el ganado y los seres humanos es causada por M. bovis, M. tuberculosis y M. avium subsp. var Paratuberculosis (M. paratuberculosis). Se realizaron pruebas de tuberculina y radiografías en un grupo seleccionado de ganado lechero (N=700) y seres humanos (N=20). Se realizaron pruebas de aspiración de los ganglios linfáticos preescapulares de ganado con prueba de tuberculina positiva y de orina, tos, líquido pleural y peritoneal de seres humanos sospechosos mediante tinción de Ziehl Neelsen. Se analizaron reacciones en cadena de polimerasa (PCR) multiplex dirigidas al ARN 16sr (1030 pb, 180 pb) del ganado y 11 humanos sospechosos. Para detectar la infectividad debida a M. bovis y M. tuberculosis, se analizaron muestras seleccionadas de ganado (N=11) y humanos (N=11) en PCR uniplex dirigidas a los genes MPB83 (600 pb) y H37Rv Rv3479HP (667 pb) respectivamente. Los resultados de la PCR mostraron que todas las muestras bovinas y siete humanas generaron amplicones de 600 pb específicos del gen MPB83. Dos ADN bovino y siete humanos generaron amplicones de 667 pb específicos del gen H37Rv Rv3479HP. Siete bovinos se infectaron con M. bovis y dos con M. tuberculosis. Dos bovinos se coinfectaron con M. bovis y M. paratuberculosis. Cuatro humanos se infectaron con M. bovis y siete con M. tuberculosis. El gen MPB83 es ​​invariablemente compartido por M. bovis y M. tuberculosis. El protocolo de PCR diseñado para el fragmento del gen H37Rv Rv3479HP (667 pb) es selectivo para M. tuberculosis. Los resultados de la secuenciación mostraron una mutación puntual en los genes 16srRNA, MPB83 y H37Rv Rv3479HP. Los análisis filogenéticos de los genes seleccionados de M. bovis y M. tuberculosis mostraron que los organismos pertenecían al linaje 1. La prueba intradérmica de tuberculina y la microscopía de frotis no pudieron diferenciar la infectividad debida a M. bovis o M. tuberculosis. La técnica de PCR diseñada parece específica para M. tuberculosis, se puede utilizar para detectar causas de tuberculosis en mamíferos y diseñar futuras estrategias preventivas en consecuencia.