Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Detección de especies de Mycoplasma en cultivos celulares mediante un protocolo de reacción en cadena de la polimerasa específico del género

Claudia F. Lobos, María A. Martínez y Carlos O. Navarro

La contaminación de cultivos celulares con Mycoplasma spp. complica la investigación básica y el desarrollo de productos biológicos. Los efectos de estas bacterias sobre las células cultivadas son cambios en el metabolismo, propiedades inmunológicas y bioquímicas, crecimiento, viabilidad, etc. La infección por Mycoplasma spp. en cultivos celulares puede
no ser detectada por inspección visual o microscopía común. Por lo tanto, es importante realizar evaluaciones periódicas de rutina con un método rápido de alta sensibilidad y alta especificidad. En relación con lo anterior, esta memoria se basó en el diagnóstico molecular de Mycoplasma spp., mediante la detección del gen 16S rRNA mediante la técnica convencional de reacción en cadena de la polimerasa, en muestras de cultivos celulares de diferentes laboratorios de la Universidad de Chile y del Instituto de Salud Pública de Chile. Los resultados obtenidos tanto en controles positivos como negativos, permitieron validar este método en la Facultad de Ciencias Veterinarias y aplicarlo en muestras sospechosas del Instituto de Ciencias Biomédicas de la Universidad de Chile. Este hallazgo fue verificado mediante el alineamiento de secuencias de nucleótidos utilizando los software Clustal Ω y BLAST, ambos gratuitos en línea, arrojando un porcentaje de identidad de nucleótidos del 97% respecto a Mycoplasma spp. del GeneBank®.