Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Desarrollo y caracterización del rendimiento de la prueba ELISA sándwich de doble antígeno para la detección de anticuerpos contra Mycoplasma bovis

Haifeng Luo, Yanan Guo, Peng Sun, Shuqiang Guo, Shenghu He, Ping Zhao, Liangbei Ke y Heping Zhang

Resumen
Antecedentes: Mycoplasma (M.) bovis es un patógeno importante del ganado, que está asociado con la aparición de muchas. Actualmente no existe una vacuna efectiva para prevenir las infecciones por M. bovis, y no hay
vacunas comerciales disponibles actualmente, por lo que el enfoque de detección muestra la importancia para el control de la enfermedad y la vigilancia de la prevalencia de M. bovis.
Objetivo: Desarrollar y optimizar un ELISA, y evaluar el rendimiento analítico, diagnóstico y epidemiológico.
Animales: Muestras de suero de campo (n = 368) de 9 granjas de ganado en diferentes condados de la provincia de Ningxia, China.
Métodos: Se compararon diferentes principios de detección de anticuerpos ELISA, y se optimizaron los parámetros del sándwich de doble antígeno (DAS) ELISA con antígeno recombinante P48. Todas
las muestras de suero se analizaron con DAS ELISA y un kit de referencia. La precisión, la sensibilidad y la especificidad se evaluaron utilizando la curva ROC, y se utilizó el diagrama de cajas para el
análisis de prevalencia y rendimiento epidemiológico.
Resultados: El análisis de la curva ROC para DAS ELISA mostró que el área bajo la curva fue de 0,807 (p <0,001). Con un punto de corte de DO 1,5, la sensibilidad diagnóstica fue de 69,16% (intervalo de confianza [IC] del 95%, 59,5% a 77,7%) con una especificidad diagnóstica de 72,8% (IC del 95%, 67,0% a 78,1%). Se detectaron 6 de 9 granjas infectadas con M. bovis y la tasa de relevancia fue de 81,43%, 75,00%, 65,79%, 33,33%, 38,64% y 72,84% con DAS ELISA respectivamente, mayor que 50,00%, 50,00%, 28,95%, 3,33%, 29,55, 40,74% con el kit de referencia.

Conclusiones: La prueba DAS ELISA optimizada proporcionó un rendimiento serodiagnóstico claramente mejorado y una sensibilidad y especificidad suficientes, y será una herramienta mejorada para la vigilancia
y prevención de M. bovis.