Revista de ciencia veterinaria y diagnóstico médico

Sistema de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP): una revisión exhaustiva con especial referencia a la medicina veterinaria

Venkatesan G*, Kushwaha A, Kumar A, Poulinlu G, Karki M, Sasikumar P

La amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) es un ensayo de amplificación de ácidos nucleicos simple, rápido, económico, sensible y específico a una temperatura constante en un baño de agua/bloque térmico mediante el uso de la ADN polimerasa Bst. Existe la necesidad de una técnica de diagnóstico económica y robusta como alternativa a los ensayos de PCR y qPCR. Se ha descubierto que el ensayo LAMP es entre 10 y 100 veces más sensible que la PCR. Esta técnica utiliza cuatro cebadores especialmente diseñados capaces de reconocer seis regiones diferentes en el ADN objetivo, de modo que la especificidad es extremadamente alta. Hay varios métodos de detección disponibles para reacciones de amplificación en tubo cerrado en un solo recipiente para minimizar/controlar la contaminación por arrastre durante la apertura de los tubos amplificados. La técnica LAMP se emplea en el diagnóstico clínico de patógenos, incluidos los virus, y otras aplicaciones, a saber, la tipificación de polimorfismos de un solo nucleótido (SNP), la inspección de adulteraciones de carne y la detección de OGM, la determinación del sexo, la detección de pesticidas, la detección de tumores y la cuantificación de ADN molde. Como método LAMP de tubo cerrado, la LAMP se puede utilizar como herramienta de diagnóstico de campo en entornos de bajos recursos donde las pruebas de diagnóstico pueden resultar poco prácticas. Esta revisión se centra en el principio de la LAMP, los métodos de detección, las modificaciones de la LAMP, las ventajas sobre los diagnósticos moleculares de rutina y sus aplicaciones en medicina veterinaria.