Revista de métodos y biología molecular

Regeneración y reutilización de insertos de cultivo de tipo Transwell para el modelado de la barrera hematoencefálica

Margarita Shuvalova1,2,3,* y Georgii Nosov2,3

Los insertos de cultivo de tipo Transwell se utilizan ampliamente en laboratorios de todo el mundo para modelar vasos no cerebrales, la barrera hematoencefálica (BHE) y otras barreras hematoencefálicas, y también para el estudio de quimiotaxis y transmigración. Sin embargo, el uso de insertos puede generar residuos plásticos que tienen un impacto ambiental debido a su diseño único y consumo masivo. Por lo tanto, es importante desarrollar un método que pueda reducir la utilización de insertos pero que no afecte la eficiencia de la investigación. En este estudio, proponemos utilizar una mezcla 1:1 (v:v) de 30% de peróxido de hidrógeno y 99% de ácido sulfúrico (“solución de piraña”) para eliminar por completo los restos celulares y la matriz de los insertos de cultivo. Los modelos de modelado de la barrera hematoencefálica con insertos regenerados utilizando solución de piraña tienen propiedades de barrera comparables a las de los insertos frescos. Demostramos que la solución de piraña es un reactivo eficaz y permite la reutilización de insertos de tipo Transwell para el modelado de la barrera hematoencefálica hasta 5 veces. Por lo tanto, el uso de este método reduce en gran medida la producción de residuos de laboratorio y beneficia a numerosos laboratorios en todo el mundo.