Revista de toxicología y farmacología forense

Un método MRM de inyección rápida de flujo de dilución y disparo para la cuantificación de EtG en orina

Alagandula R y Guo B

La cuantificación de glucurónido de etilo (EtG, un metabolito y biomarcador del etanol) en orina es de gran interés tanto en aplicaciones forenses como clínicas. Actualmente, una sola ejecución de LC-MS/MS puede cuantificar la gran mayoría de drogas y sustancias de abuso incluidas en el panel integral de pruebas de drogas en orina (UDT), pero EtG debe cuantificarse en una ejecución separada porque EtG es polar, lo que limita el rendimiento de los métodos actuales basados ​​en MS. En este estudio, desarrollamos un método MRM simple y rápido para cuantificar EtG en orina sin separación LC. Brevemente, una muestra de orina que contiene EtG se diluye primero 20 veces, seguido de una inyección de flujo directo de la muestra diluida a la fuente ESI. La cuantificación de EtG se logró mediante monitoreo de reacción múltiple (MRM) operado en modo negativo con EtG marcado con isótopo estable como estándar interno. El método fue completamente validado y tiene un rango dinámico de 50-2000 ng/mL (R2>0,998). Los coeficientes de variación y los errores relativos para los estudios inter e intraensayos se situaron en el rango de 2,4-4,2%, respectivamente. Además, se realizó una prueba de robustez con >1200 inyecciones de muestras de orina y no se observaron deterioros significativos en la sensibilidad y especificidad. Este nuevo método tiene un tiempo de ejecución total de solo 2 minutos por muestra, lo que permite el análisis de >700 muestras por día con un solo espectrómetro de masas.